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银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测

2020-06-25 20:11:30 来源:槐槐网

银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测

中华皮肤科杂志 1998年第2期第31卷 论著摘要

作者:张开明 尹兴平 杨小英 周敏

单位:030009 山西省太原市中心医院

近年研究发现细胞间粘附分子(ICAM-1)在银屑病发病中有一定作用[1~4],为此,我们采用ELISA法对34例银屑病患者血清可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平进行了测定,并对部分患者外周血单一核细胞(PBMC)ICAM-1表达进行了研究,现将结果报道如下。

一、病例和方法

(一)检测对象:取自1996年9月至1997年3月我科门诊及住院的银屑病患者,共34例,其中男22例,女12例;年龄14~52岁,平均36岁;病程6天至24年;其中进行期寻常型银屑病16例,静止期寻常型银屑病15例,红皮病型银屑病2例,脓疱型银屑病1例。皮损程度计算按照PASI积分法[5],病例选择3周内(红皮病型除外)未系统或大面积外用过皮质类固醇激素、免疫抑制剂及维胺脂类等药物的患者。正常对照组33例,为门诊体检筛选出的正常人(24例)及科内健康工作者(9例),性别及年龄尽量与检测患者相同或相近。

(二)试剂:sICAM-1试剂盒为Medgenix公司产品,APAAP试剂盒为军事医学科学院基础所产品,鼠抗人ICAM-1单克隆抗体为Zymed公司产品,购自北京中山试剂公司。

(三)方法:

1.血清sICAM-1测定:抽静脉血2ml,分离血清,置于-40℃备用待测,所有患者及对照组均是同步测定,采用双抗体夹心ELISA法,将标准品、血清样品及空白(生理盐水)加入96孔酶板中,每孔25μl,均为复孔,每孔再加入75μl辣根过氧化物酶标记的单抗,20℃振荡 孵育2小时,弃去孔内液体,每孔加入洗涤液400μl,重复洗涤3次,之后每孔加入显色液200μl,20℃振荡 孵育30分钟,最后每孔加入50μl 1.8N H2SO4终止反应,置芬兰Labsysterms酶标仪450nm及650nm(双波长法)处测各孔吸光度(A值),绘制标准曲线,从中求得sICAM-1含量(单位:ng/ml)。

2.PBMC ICAM-1染色:患者组为15例,对照组16例,抽静脉血后密度梯度离心,常规分离PBMC,离心涂片机涂片,采用APAAP法,最后于显微镜下计数300个有核细胞,然后统计出每百个有核细胞阳性细胞数(PBMC ICAM-1+%)。

3.统计学处理:采用SPSS软件包进行t检验及相关分析。

二、结果

1.银屑病患者血清sICAM-1水平及PBMC ICAM-1+%结果见附表。进行期血清sICAM-1水平(258.7±153.6ng/ml)

附表 银屑病患者血清sICAM-1水平

及PBMC ICAM-1+%结果

与静止期(178.5±32.7ng/ml)比较,t=2.63,P<0.01,两组间有显著性差异,静止期与对照组比较无显著性差异(P>0.05),2例红皮病型和1例脓疱型银屑病患者血清sICAM-1水平分别为387.6、364.5及428.3ng/ml。

2.血清sICAM-1水平与PASI的关系经相关分析,r=0.56,P<0.01,两者之间有显著的正相关关系。

三、讨论

ICAM-1是一种单链糖蛋白,与白细胞表面的LFA-1和Mac-1互为配体,主要分布于成纤维细胞、上皮样细胞及血管内皮细胞表面[1~3],其主要作用是介导多种细胞间的相互粘附,在炎症和免疫反应中有一定的作用[1],sICAM-1是细胞膜表面的ICAM-1“脱落”进入血清而形成的,正常人血清中sICAM-1水平约100~200ng/ml。Griffiths等[4]报道银屑病患者血清sICAM-1增高,我们测定的结果显示34例银屑病患者血清sICAM-1水平与对照组比较明显增高(P<0.01),患者组PBMC ICAM-1+%与对照组比较明显增高。由于sICAM-1的主要生物学作用是与细胞膜ICAM-1竞争性结合白细胞膜表面的相应配体[1,2],而血管内皮细胞表面可表达ICAM-1[1~4],所以我们推测银屑病患者血清中增高的sICAM-1可能通过血管内皮ICAM-1竞争性地结合白细胞膜上的LFA-1和Mac-1,从而对中性粒细胞与内皮细胞粘连以及通过血管壁具有抑制作用。推测sICAM-1在银屑病进行期可能具有一定的保护作用,即抑制白细胞与血管内皮细胞粘附。

参 考 文 献

1 冯信忠. 细胞粘附分子与皮肤病理. 国外医学皮肤性病学分册, 1997,23∶109-111.

2 Veale D, Rogers S, Fitzgerald O. Immunolocalization of adhesion molecules in psoriatic arthritis, psoriatic and normal skin. Br J Dermatol, 1995,132∶32-38.

3 Griffiths CEM. Boffa MJ. Gallatin WM, et al. Elevated levels of circulating intercellular adhesion molecule-3(cICAM-3) in psoriasis. Acta Derm, Venereol(Stockh), 1996,76∶2-5.

4 Griffiths CEM, Boffa MJ, Gallatin WM, et al. Circulating ICAM-1, ICAM-3 and TNF-receptor in psoriasis——Correlation with disease severity. Br J Dermatol, 1995,133(Suppl 45)∶17.

5 Frolriksson T, Petterson U. Severe psoriasis-oral therapy with a new retinoid. Dermatologica, 1997,157∶238.

(收稿:1997-05-04修回:1997-08-27)

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